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詳細解析基因?qū)雰x的工作原理和特點

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  基因?qū)雰x采用整機一體化設計,操作簡單,顯示直觀,主要是利用電轉(zhuǎn)化來將DNA轉(zhuǎn)入感受態(tài)細胞、動植物細胞、酵母細胞中。與其它方法相比,電轉(zhuǎn)化法具有高重復性、高效率、操作簡易、可定量控制等優(yōu)點,已經(jīng)成為分子生物學基本技術。
 
  基因?qū)雰x的工作原理
  細胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn)),也叫細胞電穿孔 (electroporation),是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等以及一些小分子導入細胞膜內(nèi)部的重要方法。
  在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計,細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處。
  由于電轉(zhuǎn)技術依靠的是物理方法,細胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小。相比化學轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,電轉(zhuǎn)可以用在所有的細胞種類上,而且容易定量控制。
 

 

  應用領域:
  1.細菌、酵母及其他微生物的電轉(zhuǎn)化。
  2.導入藥物、蛋白、抗體等分子對細胞的結(jié)構(gòu)和功能進行研究。
  3.細胞雜交、融合基因?qū)搿?/div>
  4.導入標記基因起到標記、指示的作用。
  5.哺乳動物細胞的轉(zhuǎn)染、植物組織和原生質(zhì)體的轉(zhuǎn)染。
 
  基因?qū)雰x的性能特點:
  1.效率高:轉(zhuǎn)化時間短、轉(zhuǎn)化率高、重復性優(yōu)異。
  2.智能儲存:可存儲實驗參數(shù),方便用戶調(diào)取。
  3.控制精準:采用微處理器控制的脈沖放電。
  4.外形美觀:整機一體化設計,顯示直觀,操作簡單。

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